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更新时间:2019-04-03

腺病毒(Adenovirus)是目前可靠的重组病毒表达系统之一,可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。

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     腺病毒(Adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的病毒颗粒,为线状双链DNA分子,约含35000 bp,两端各有长约100 bp的反向重复序列。

     腺病毒为5型血清型腺病毒,缺失了腺病毒的早期表达基因序列E1区和E3区。E1是腺病毒复制所必须的,E1的缺失使其不能自身复制,只能依靠包装细胞如HEK293细胞提供的反式互补进行复制扩增,以此保证腺病毒的安全性。E3基因表达的蛋白能对抗宿主的抗病毒防御系统,E3区的去除能减少宿主的体内免疫反应。

      腺病毒包装采用的是AdMax系统,通过Cre-loxp重组酶,使共转染到HEK293细胞中的腺病毒载体穿梭质:凸羌苤柿#ㄏ俨《净?蜃橹柿#┰谥刈槊傅淖饔孟虏??刈橄俨《,获得的病毒滴度更高,其病毒滴度可以达到1×10^12pfu/ml 。

      腺病毒载体有CMV、mCMV、CAG、PGK、UbC、EF1a、等多种启动子可供选择;而且还有EGFP、ZsGreen、tdTomato、mCherry、EYFP等多种荧光标记蛋白可供选择。
客户须知
1.    需客户提供相关基因信息(基因ID、名称、序列等)

提供结果

1.    提供完整的实验流程报告、测序文件、实验图片、实验数据等。

2.    提供腺病毒感染各类细胞的相关实验,为您提供全面的实验服务,详情请咨询技术支持.

实验流程

1. 目的基因获取。

2. 构建腺病毒表达载体。

3. 针对目的基因设计合成siRNA,进行靶筛。

4. 构建腺病毒shRNA载体。

5. 线性化腺病毒载体。

6. 转染HEK293细胞。

7. 收集细胞裂解液。

8. 感染HEK293细胞,放大培养重组腺病毒。

 

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