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更新时间:2019-04-02

病理组织包埋染色,苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

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一、常规病理组织包埋染色HE染色步骤

1、石蜡切片脱蜡复水:

(1)二甲苯(Ⅰ) 15min

(2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min

(3)二甲苯:无水乙醇=1:1 2min

(4) 100%乙醇(Ⅰ) 5min

(5) 100%乙醇(Ⅱ) 5 min

(6) 80%乙醇 5min

(7) 蒸馏水 5 min

2、苏木精液染色:

(1) 苏木精液染色 5 min

(2) 水洗10 min 或流水冲洗5 min返蓝

(3) 1%盐酸乙醇 30s分化

(4) 水洗 30 s

(5)蒸馏水过洗 5 s

3、伊红液染色

(1) 0.5%伊红液染色 1-3 min

(2) 蒸馏水稍洗 30 s

4、脱水封片

(1) 80%乙醇稍洗 30 s

(2) 95%乙醇(Ⅰ)1 min

(3) 95%乙醇(Ⅱ) 1 min

(4) 无水乙醇 (Ⅰ)3 min

(5)无水乙醇(Ⅱ)3 min

(6)二甲苯(Ⅰ) 3 min

(7)二甲苯(Ⅱ) 3 min

(8)中性树胶封固

二、病理组织包埋染色HE染色结果的判断

1、病理组织包埋染色HE染色实验结果

    细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。

    着色深浅与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。

2、病理组织包埋染色H-E染色评定标准:

(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均匀,无皱褶无刀痕;

(2)染色核浆分明,红蓝适度,透明洁净,封裱美观。

 

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